真菌染色液(六胺银法)

发布时间:2020-1-16      阅读次数:6959
产品编码 产品名称 规格 单位 有效期
BA4244B 真菌染色液(六胺银法) 20测试 1年


       【原理

         标本经高碘酸氧化后,使真菌和其他机会性生物的细胞壁内的粘多糖暴露出醛基,醛基将六胺银还原为黑色的金属银。硫代硫酸钠对已显色的银盐起固定作用,并除去未反应的银离子。
 
【样本要求】
挑取样本制成涂片,涂片时必须注意细心操作,涂片薄而均匀。制备的涂片应自然干燥,若采取加热固定,固定温度不宜过高,以玻片背面接触手背不烫为准,否则可能使标本的形态改变影响观察结果。
 
【检验方法】
一、工作液配制:(一份工作液约8.2ml,可染8 张片):
使用器材(自备):一次性试管、移液器,一次性吸嘴、滴管。
200μl 硝酸银溶液+3ml 六次甲基四胺溶液+1 瓶硼砂溶液,混合成一份工作液。
具体操作:于洁净的试管内加入200μl 硝酸银溶液和3ml 六次甲基四胺溶液,充分混匀,然后倒进1 瓶硼砂溶液的瓶内,充分摇匀,如肉眼见少许透明颗粒,属正常现象,请勿过滤,备用。
(请按照以上顺序进行配制,以免影响工作液的效果。若工作液在当天用完,则放常温储存即可;若在当天未能用完,则须密封避光放2℃~8℃冰箱储存,并在一个月内使用完)。
 
【染色步骤】
1、挑取样本制成涂片,自然干燥后加热固定;
2、滴加高碘酸溶液氧化15min,蒸馏水稍洗;
3、将涂片放入染色玻片盒内,并将玻片盒置于62℃水浴箱中,使玻片盒漂浮于水面上。滴加1ml 工作液于涂片上,再
盖上盒盖和水浴箱盖,染色5~10min,见标本有黄棕色反应时,取出。(注意:工作液不能接触到金属离子,请确保水浴
箱的温度到达62℃);
4、用蒸馏水洗后镜检,如着色不够深,再重复步骤3 继续作用;
5、流水冲洗;
6、用硫代硫酸钠溶液处理3min,流水冲洗;
7、用亮绿染液复染30~60s,水洗,待干,油镜观察。
 
【染色结果】
真菌的菌丝及孢子呈棕黑色或黑色,结构清晰明显,背景为绿色。
 

*禁忌内容或注意事项详见说明书


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